Abstrakt

Konjugationsreaktion von N-Acetyltyrosin mit Adenosintriphosphat (ATP), katalysiert durch das Fe(II)/H2O2-System

Jian Zhang*

Eine Konjugationsreaktion von N-Acetyltyrosin mit Adenosintriphosphat (ATP) wurde mittels Massenspektrometrie untersucht , um den Mechanismus der Tyrosinphosphorylierung in Proteinen zu verstehen. Eine Reaktionslösung mit 10 mM N-Acetyltyrosin, 6,4 mM ATP-Dinatrium, 250 μM FeCl2 und 0,15 % H2O2 wurde in 500 μL 20 mM Ammoniumbicarbonat (pH 7,4) hergestellt. Die Reaktionen wurden 48 Stunden bei Raumtemperatur ablaufen gelassen, anschließend wurde eine Massenspektrometrie durchgeführt. Es wurde festgestellt, dass diese Reaktion durch das Fe(II)/H2O2-System und das Carboxylende von N-Acetyltyrosin katalysiert wurde, das an das Eisenion gebunden war. Die Reaktionsprodukte scheinen Kondensate der phenolischen Gruppe von Tyrosin und der Phosphatgruppen von ATP in einer Stöchiometrie von 1:1 und höher zu sein, was einem m/z-Wert von 736, 981 und 1248 entspricht. Die Studie zeigt auch, dass ein zusätzlicher Schritt der ATP-Hydrolyse erforderlich ist, um Phosphor-N-Acetyltyrosin (MW 303) aus dem Konjugat herzustellen. Diese Reaktion könnte der Vorläuferschritt der Tyrosinphosphorylierung in lebenden Organismen sein.