Abstrakt

Molekulare Klonierung und funktionelle Expression eines wasserlöslichen Chlorophyll-bindenden Proteins der Klasse IIA aus Brassica nigra

Mayuko Ono, Shigekazu Takahashi, Risa Shibata, Mizuki Tomizawa, Katsumi Nakayama und Hiroyuki Satoh

In einigen Pflanzen der Brassicaceae wurden nicht photokonvertierbare, wasserlösliche Chlorophyll-bindende Proteine, sogenannte WSCPs der Klasse II, identifiziert. Obwohl das WSCP in schwarzem Senf (Brassica nigra) das zweite WSCP der Klasse II war, das von Murata und Murata beschrieben wurde, wurde die cDNA bisher nicht geklont. In dieser Studie haben wir eine cDNA geklont, die das WSCP aus schwarzem Senf (BmWSCP) kodiert, und seine Chlorophyll-Bindungsaffinität anhand seines rekombinant exprimierten Proteins analysiert. Sequenzanalysen ergaben, dass der reife Bereich der BmWSCP-cDNA voraussichtlich 534 bp lang ist und ein Protein mit 178 Aminosäureresten kodiert. Rekombinantes BmWSCP wurde in Escherichia coli als Hexahistidin-Fusionsprotein exprimiert und konnte erfolgreich an Chlorophylle binden, wobei die höchste Affinität zu Chl a auftrat, was bestätigt, dass die cDNA ein WSCP der Klasse IIA in schwarzem Senf kodiert.