Abstrakt

Isolierung und Charakterisierung von IgM aus Blutserum bengalischer Ziegen

Atanu Koner, Pallavi S. Rajput, Rajat Dhyani, Nikki Nidhi und Kuljeet Kaur

Die Isolierung von IgM aus dem Blutserum bengalischer Ziegen erfolgte durch Zentrifugation des gesammelten Serums zur Entfernung der Blutkörperchen, und die Reinheit des Serums wurde durch das Fehlen von Pellets bestätigt. Gereinigtes Serum wurde durch Ammoniumsulfatfällung gewonnen. Das durch Dialyse gewonnene isolierte IgM wurde durch Kieselgelchromatographie unter Verwendung von phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) als Lösungsmittel mit unterschiedlichem pH-Wert quantifiziert und in verschiedene Fraktionen (nämlich I, II, III, IV und V) unterteilt. Die Proteinquantifizierung erfolgte mit der Lowry-Methode, und das Molekulargewicht wurde durch SDS-PAGE mit einem Standardmarker bestimmt. Das Vorhandensein von IgM wurde durch Immundiffusion und Immuno Dot Blot bestätigt. Die Ergebnisse des Experiments legen nahe, dass die Fraktionen I, II und III mehr gestresstes Protein enthalten, das eine gewisse Ähnlichkeit mit Ovalbumin aufweist. Die resultierende Farbintensität, die bei der Durchführung eines Immuno Dot Blots unter Verwendung von IgM als primärem Antikörper erhalten wurde, zeigt, dass Fraktion II die höchste Konzentration an gestresstem Protein enthält.