Abstrakt

Eine umfassende Methode zur Identifizierung von Hitzeschockproteinen (HSPs)

Pielesz A, Machnicka A, Binias D und Sarna E

Da kein Modell jemals die klinische Wundheilung beim Menschen vollständig nachbilden kann, ist es wichtig, dass das verwendete Modell sorgfältig ausgewählt wird. Anatomisch und physiologisch ist Geflügelhaut der menschlichen Haut in vielerlei Hinsicht ähnlich. Daher wurde in dieser Studie organische Hühnerhaut (ein Ex-vivo-Modell für Haut mit Brandverletzungen) analysiert. Acetatelektrophorese (CAE), mikrobiologische Verfahren, Fourier-Transformations-Infrarotspektrometrie (FTIR) und Rasterelektronenmikroskopie (SEM) wurden alle durchgeführt, nachdem Proben der Modellhühnerhaut auf eine Temperatur erhitzt wurden, die einen Brandvorfall simulierte und die Freisetzung von Hitzeschockproteinen (HSPs) stimulierte. Aggregate mit geringerem Molekulargewicht, HSP37-Proteine, wurden durch Celluloseacetatelektrophorese isoliert. FTIR-Tests zeigten, dass das Erhitzen einer trockenen organischen Hühnerhaut bis zum Siedepunkt zur Bildung von β-Faltblattaggregaten führt, die die Reaktion des Proteins auf einen thermischen Schock darstellen. Aggregate von HSP37 werden bei thermischen Verletzungen gebildet und in diesem Modell geht nicht die gesamte antimikrobielle Aktivität der Haut verloren. Die in der verbrannten Haut gefundenen antimikrobiellen Peptide, HSP-Proteine, wurden durch mikroskopische, mikrobiologische, elektrophoretische und spektroskopische Untersuchungen bestätigt.