Abstrakt

Eine Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie-Methode zur Bestimmung von Alpha-Ketoglutarsäure im menschlichen Plasma.

Gundoju Suresh, PE Thirugnanam und Atmakuru Ramesh

Alpha-Ketoglutarsäure (A-KG) wird derzeit als vielversprechendes krebszellschädigendes Mittel und Cyanid-Gegenmittel untersucht. Zur quantitativen Bestimmung von A-KG in menschlichem Plasma wurde eine einfache, spezifische Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie-Methode (LC-MS/MS) entwickelt. Die Derivatisierung von A-KG wurde durch Verwendung von N-Methylimidazol in Gegenwart von Trifluoressigsäureanhydrat erreicht. Mehrere Parameter, die den Ertrag der Derivatisierungsreaktion beeinflussten, wie Reaktionstemperatur und -zeit, wurden optimiert. Ein Imidazolderivat von A-KG wurde mithilfe von Methyl-tert-butylether extrahiert und im positiven Elektronen-Spry-Ionisationsmodus quantifiziert (Masse-Ladungs-Verhältnis (m/z): 197). Die Methode wurde anhand von Parametern wie Spezifität, Linearität, Nachweis- und Quantifizierungsgrenze, Präzision, Richtigkeit, Wiederfindung, Robustheit und Robustheit vollständig validiert. Die Linearität wurde über einen Konzentrationsbereich von 100-2500 ng mL-1 mit einem Korrelationskoeffizienten (R2) von 0,9991 nachgewiesen. Die Nachweis- und Quantifizierungsgrenze betrug 40 bzw. 100 ng mL-1. Die Genauigkeit und Präzision innerhalb und zwischen den Tagen lagen innerhalb der akzeptablen Grenzen (<8 %). Die Robustheit und Robustheit wurden anhand des Plackett-Burman-Versuchsdesigns bewertet.