Abstrakt

Auswirkungen von Scriptaid auf den Zellzyklus und die Histonacetylierung von kernhaltigen Cumuluszellen von Schafen und ihre Fähigkeit, die Entwicklung von Embryonen durch Kerntransfer somatischer Zellen zu unterstützen

Hui Cao, Wenlong Su, Junjie Li, Bingqiang Wen, Shujun Tian, ​​Shuchun Sun, Lu Li, Hanyang Wang und Jiexin Li

Überzeugende Beweise legen nahe, dass der Histon-Deacetylase-Inhibitor (HDACi) die Entwicklung von Embryonen durch somatischen Zellkerntransfer (SCNT) beeinflusst. Die vorliegende Studie wurde durchgeführt, um die Wirkung der Vorbehandlung von Spender-Cumuluszellen mit Scriptaid (einem neuen HDACi) auf den Zellzyklus, die Histonacetylierung und die Entwicklung von Klonierungsembryonen bei Schafen zu bestimmen. Zunächst optimierten wir die Effizienz von Scriptaid in einer Dosis (0, 0,1, 0,2, 0,4 und 0,8 μmol/l) und zeitabhängigen (0, 12, 24, 36 und 48 h) Weise auf die Entwicklungsfähigkeit dieser Embryonen. Dann bewerteten wir die Veränderungen der Acetylierungsgrade in Histon H3 Lysin 9 (acH3K9) und Histon H4 Lysin 12 (acH4K12) von Cumuluszellen und SCNT-Embryonen quantitativ durch Immunfluoreszenzfärbung. Darüber hinaus haben wir den Anteil der Zellen in der G0/G1-Phase in Cumuluszellen ermittelt. Wir stellten eine signifikant verbesserte Blastozystenentwicklungsrate von geklonten Embryonen fest, die aus Spender-Cumuluszellen stammten, die 24 Stunden lang mit einer geringen Dosis (0,2 μmol/l) Scriptaid vorbehandelt wurden (21/86 [24,39 %] vs. 11/85 [12,91 %]; P < 0,05). Gleichzeitig verbesserten sich auch die acH3K9- und acH4K12-Werte in Cumuluszellen und SCNT-Embryonen signifikant (P < 0,05). Darüber hinaus befanden sich mehr mit Scriptaid vorbehandelte Cumuluszellen in der G0/G1-Phase als in der Kontrollgruppe (84,22 % vs. 75,96 %, P < 0,05). Zusammenfassend lässt sich sagen, dass mit Scriptaid behandelte Spendercumuluszellen sich positiv auf die frühe Entwicklung von SCNT-Embryonen auswirken und den Anteil der acH3K9/acH4K12- und G0/G1-Phasenzellen an Cumuluszellen erhöhen. Scriptaid kann verwendet werden, um die Effizienz des Kerntransfers somatischer Zellen bei Schafen zu verbessern.