Abstrakt

Effiziente Isolierung und funktionelle Analyse spontaner Streptococcus thermophilus Bakteriophagen-unempfindlicher Mutanten

Chengjie Ma, Jinzhong Lin, Guangyu Gong, Zhenmin Liu, Zhengjun Chen, Aimin Ma

Die Verwendung bakteriophagenresistenter Stämme mit zufriedenstellenden technologischen Eigenschaften ist für die Vermeidung von Phageninfektionen in industriellen Fermentationsprozessen unerlässlich . Hier beschreiben wir eine verbesserte Methode zur Isolierung spontaner bakteriophagenunempfindlicher Mutanten (BIMs) von Streptococcus thermophilus. Die Konzentration großer Mengen sekundärer S. thermophilus-Kulturen, ihre Subkultur in Magermilch mit hohen Bakteriophagentitern und ihre Inokulation mit dem schnell milchsäuernden Phänotyp über mehrere Passagen hinweg waren entscheidend für die Erhöhung der Wahrscheinlichkeit der Gewinnung von Mutanten, die Verbesserung der Isolierungseffizienz und die Aufrechterhaltung der technologischen Leistung. Wir erhielten nach jeder Screeningrunde große Mengen BIMs mit einer Isolierungseffizienz von über 85 %. Wir analysierten neun BIMs, und diese waren alle ihrem Elternstamm S. thermophilus St1 in Bezug auf Synärese, Wasserhaltekapazität und scheinbare Viskosität ähnlich. Im Vergleich zum Elternstamm besaßen sieben der neun Varianten gleichwertige Säuerungsaktivitäten, während die verbleibenden zwei Varianten eine hervorragende Säuerungsleistung zeigten. In allen neun BIMs wurden ein oder zwei neue Spacer von entsprechenden Phagen gefunden, was zeigt, dass das CRISPR/Cas-System für die Phagenresistenz von S. thermophilus verantwortlich war.