Abstrakt

Identifizierung einer Breitband-Antimykotika-Chitinase aus Bacillus subtilis Stamm BC121

Saleem Basha und Kandasamy Ulaganathan

Ein Chitinase-Enzym, Chi25, wurde aus dem Überstand des kultivierten Bacillus subtilis-Stamms BC121 durch Ammoniumsulfatfällung und Chitin-Affinitätschromatographie gereinigt. Die Reinheit des Enzyms wurde durch SDS-PAGE- und RP-HPLC-Analyse bestätigt und das Molekulargewicht des Enzyms wurde auf ca. 25 kDa geschätzt. Das Enzym war in einem pH-Bereich von 6–7,5 stabil, während der optimale pH-Wert für die Enzymaktivität 6,5 betrug. Chi25 war in einem Temperaturbereich von 25–40 °C stabil, wobei 35 °C die optimale Temperatur für die Aktivität war. Ein Bioassay von Chi25 zeigte die Hemmung der Sporenkeimung und Hyphenausbreitung wichtiger pflanzenpathogener Pilze. Ergebnisse der Gewächshausversuche zeigten, dass der Wildtyp-Stamm (BC121) das Auftreten der Fusarium-Welke um 80 % reduzierte. Eine vergleichende Analyse sowohl des Wildtypstamms (BC121) als auch des mutierten Stamms dieses Bakteriums (BC121M) ergab, dass der Antagonismus des Stamms BC121 gegenüber pflanzenpathogenen Pilzen sowohl in vitro als auch in vivo auf das Enzym Chi25 zurückzuführen ist.