Abstrakt

Verbesserung der Beta-Carotin-Produktion in Yarrowia lipolytica durch Zusammenstellung mehrerer Kopien von Beta-Carotin-Biosynthesegenen aus Blakeslea trispora

Shengming Yin, Yuanjie Wu, Songbai Yang und Shaoxin Chen

Zur Produktion von β-Carotin werden mehrere Kopien der β-Carotin-Biosynthesegene des kommerziell bedeutenden Pilzes Blakeslea trispora in Yarrowia lipolytica integriert . β-Carotin-Biosynthesegene von B. trispora bzw. Mucor circinelloides wurden in Y. lipolytica exprimiert und carRA und carB von B. trispora zeigten eine höhere Aktivität bei der Produktion von β-Carotin (4,35 mg/l). Zur Produktion höherer Mengen β-Carotin wurden gentechnisch veränderte Stämme mit unterschiedlichen Kopien von carRA , carB , dem Gen für die Geranylgeranyl-Diphosphat-Synthase (GGS) und dem Gen für die HMG-CoA-Reduktase (HMG) konstruiert, um die Ausbeute an β-Carotin zu untersuchen. Der gentechnisch veränderte Stamm YC607 mit drei Kopien von carRA , carB und GGS sowie zwei Kopien von HMG konnte während der Schüttelkolbenkultur 72,89 mg/l β-Carotin produzieren. Darüber hinaus wurden 613,87 mg/l β-Carotin durch Fed-Batch-Fermentation durch Zufuhr von Glycerin gewonnen. β-Carotin-Biosynthesegene von B. trispora können in Y. lipolytica exprimiert werden , und mehrere Kopien von β-Carotin-Synthesegenen können große Mengen an β-Carotin produzieren.