Abstrakt

Reinigung und Charakterisierung von �²-Galactosidase aus Kluveromyces lactis, isoliert aus einer Joghurtabfalldeponie

Tolulope T. Oluwaniyi, Bridget O. Omafuvbe, Femi K. Agboola

Einige Eigenschaften der aus Kluyveromyces lactis, das aus einer Joghurtabfalldeponie isoliert wurde, extrahierten und gereinigten β-Galactosidase wurden untersucht. Die aus Kluyveromyces lactis isolierte Roh-β-Galactosidase wurde durch Ammoniumsulfatfällung und DEAE-Sephadex-Ionenaustauschchromatographie gereinigt. Die spezifische Aktivität des teilweise gereinigten Enzyms betrug 107,50 μmol/min/mg Protein und eine Ausbeute von 7 %. Das Molekulargewicht des Enzyms betrug 199 kDa, bestimmt durch Gelfiltration auf Bio-Gel P-200. Die erhaltenen Werte für die Michealis-Menten-Konstante (Km) und die maximale Geschwindigkeit (Vmax) betrugen 3,56 ± 0,62 mM und 0,61 ± 0,08 μmol/min/ml für das Enzym mit Ortho-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranosid (oNPG) als Substrat, während Km und Vmax 18,01 ± 0,23 mM und 0,15 ± 0,04 mmol/20 min/l mit Laktosesubstrat betrugen. Der optimale pH-Wert des gereinigten Enzyms betrug 7,5 und 6,5 mit oNPG- bzw. Laktosesubstrat. Die optimale Temperatur betrug 40 °C mit beiden Substraten. Diese β-Galaktosidase kann bei der Umwandlung von Molke, einem Nebenprodukt der Milchindustrie, in nützliche Produkte Anwendung finden.