Abstrakt

Screening mikrobieller Isolate für die fermentative Produktion von L-Asparaginase in Submersfermentation

Kesavapillai Balakrishnan, Aiswarya Nair und Rahul Kumar

L-Asparaginase ist ein bekanntes Aminosäuren abbauendes Enzym mit antineoplastischer Aktivität. Es ist wünschenswert, Versuche zu unternehmen, die zur Entdeckung neuer L-Asparaginase-Produzenten führen, die sich serologisch von den bislang bekannten unterscheiden, aber ähnliche therapeutische Wirkungen zeigen. 26 mikrobielle Kulturen, darunter drei mikrobielle Konsortien, wurden auf ihre Fähigkeit zur Produktion von L-Asparaginase getestet. Reinkulturen lokal isolierter Mikroben, einige kommerziell verwendete Mikroben und drei mikrobielle Konsortien (Darmkonsortien von Regenwürmern und Termiten) wurden qualitativ und quantitativ auf ihre Fähigkeit zur Produktion von L-Asparaginase untersucht. Sieben der 26 Kulturen, darunter das getestete Meerwasserisolat, lieferten im qualitativen Test durchweg positive Ergebnisse und wurden daher für weitere quantitative Studien herangezogen. Die zellfreie Fermentationsbrühe des Meerwasserisolats ergab in Stärkekaseinbrühe eine L-Asparaginase-Aktivität von 0,710 U/ml/Stunde. Für ein lokales Isolat von S. cerevisiae (BIT-74) in Hefeentwicklungsbrühe wurde ein Wert von 0,884 U/ml/Stunde ermittelt. Wenn das Hefeisolat in M9-Medium in Gegenwart von Asparagin gezüchtet wurde, erhöht sich die Enzymaktivität um den Faktor 20 %. Die Meerwasserisolate zeigten in Stärkekaseinbrühe bis zu 160 Stunden lang eine gleichbleibende Enzymaktivität, und die Geschwindigkeit der Enzymtiterakkumulation war in M9-Brühe mit Asparagin hoch. Die Ergebnisse dieser Studie zeigen deutlich, dass viele der regulären mikrobiellen Kulturen L-Asparaginase produzieren können. Einige Isolate können eine erhebliche Menge des Enzyms L-Asparaginase produzieren. Die Anwesenheit von Asparagin im M9-Medium induzierte die Enzymausbeute.