Abstrakt

Produktion von Nanobodies aus bakteriellen Quellen

Sandip Uttam Bhavar

Nanobodies bieten die unglaubliche Spezifität von Antikörpern innerhalb einer einzigen Immunglobulin-VHH-Domäne. Diese einzigartige Eigenschaft ermöglicht Anwendungen von biochemischen Werkzeugen bis hin zu therapeutischen Wirkstoffen. Bei der Nanobody-Produktion geht die Tendenz zu einfacheren, aber zuverlässigeren (bakteriellen) Technologien, die zeitaufwändigere eukaryotische Prozesse ersetzen können. Nanobody-Bibliotheken können auf verschiedene Weise synthetisiert werden, beispielsweise durch Immunisierung der Kamele oder Lamas oder durch synthetische Konstruktion. Andere Plasmidsysteme werden zum Tragen des nanobody-spezifischen Gens verwendet. Bakterien- und Zelloberflächendisplays sind neue Technologien zur Isolierung interessanter Proteine ??aus Bibliotheken. Dabei werden immunisierte, naive und synthetische Bibliotheken auf verschiedenen Bakterienquellen angezeigt. Eine stetige Zunahme der Produkttiter und die entsprechende Änderung der Verunreinigungszusammensetzung sind Herausforderungen für die Entwicklung und Optimierung von Nanobody-Produktionsprozessen. Darüber hinaus führen steigende Anforderungen an die Produktqualität zu einer höheren Komplexität der Prozesse und Analysen, was wiederum die Kosten für die Produktaufbereitung erhöht. Die Konzentration und Zusammensetzung der Verunreinigungen sind für eine effiziente Prozessentwicklung von entscheidender Bedeutung. Diese Verunreinigungen können erhebliche Schwankungen aufweisen, daher müssen wir diese Verunreinigungen durch die Kontrolle der vorgelagerten Verarbeitung kontrollieren.